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鼠抗人Bcl-X單克隆抗體注意事項(xiàng)：

1.,重復(fù)冷凍/融化循環(huán)可使抗體變性，導(dǎo)致其形成使抗體結(jié)合能力降低的聚集物。保存于-20二對(duì)于大多數(shù)抗體是適當(dāng)?shù)?保存于-80七無(wú)明

顯優(yōu)勢(shì)。冰箱不能為無(wú)霜型。這些冷凍和融化之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜）恰恰是應(yīng)該避免的。

2.抗體試劑瓶應(yīng)盈于具有最小溫度波動(dòng)的冰箱區(qū)域.例如朝冰箱后部放置而不是圈于門架上。有些研究人員加入冷凍保護(hù)劑甘油達(dá)到50%

的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點(diǎn)降低至低于-20仁。雖然這對(duì)于很多抗體是可接受的，但是只有一小部分我們提供的抗體

測(cè)試了在該保存條件下的穩(wěn)定性,并且我們的保證僅使用于按數(shù)據(jù)表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于-80七，因

為該溫度低于甘油的凝固點(diǎn)。請(qǐng)注意甘油可被細(xì)菌污染，如果加入甘油或任何冷凍保護(hù)劑，,則應(yīng)當(dāng)小心操作,以得到無(wú)菌制備物。

3.應(yīng)避免抗體在稀釋至工作濃度后在4七下保存超過一天。蛋白質(zhì)在高濃度下保存時(shí)一般不易降解，理想的濃度為1mg/m/或更高。這是在

抗休溶液中加入蛋白質(zhì)例如BSA作為穩(wěn)定劑的理論基礎(chǔ)。加入的蛋白質(zhì)也有助于減少抗體因結(jié)合于容器壁上而造成的損失。對(duì)于打算進(jìn)

行偶聯(lián)的抗體而言，由于穩(wěn)定蛋白質(zhì)會(huì)與抗體競(jìng)爭(zhēng)，降低了偶聯(lián)的效率，所以不應(yīng)加入穩(wěn)定蛋白質(zhì)。

應(yīng)注意的問題：

1、包被抗體或抗原不適，易產(chǎn)生陽(yáng)性值較小，或產(chǎn)生變異，即跳管現(xiàn)象。

2、用抗血清不純化，或純化程度太低的抗體包被，則陽(yáng)性值較小，或沒有陽(yáng)性梯度。

3、封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對(duì)照較高。